Protocolo da extração de DNA de material parafinado para análise de microssatélites em leiomioma

É apresentada a padronização de protocolo de extração de DNA de material parafinado para análise da instabilidade de microssatélites de genes relacionados ao leiomioma uterino, utilizando-se 30mg a 40mg de tecido retirado de blocos de parafina. Os blocos são desparafinizados por banhos de xi...

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Main Authors: Ericson Martins Nascimento (Author), Marilda Osti Spinelli (Author), Consuelo Junqueira Rodrigues (Author), Nilo Bozzini (Author)
Format: Book
Published: Sociedade Brasileira de Patologia Clínica, 2003-09-01T00:00:00Z.
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Summary:É apresentada a padronização de protocolo de extração de DNA de material parafinado para análise da instabilidade de microssatélites de genes relacionados ao leiomioma uterino, utilizando-se 30mg a 40mg de tecido retirado de blocos de parafina. Os blocos são desparafinizados por banhos de xilol a 65ºC, reidratados com soluções de concentrações decrescentes de ETOH e água deionizada. A extração de DNA é obtida através das etapas de lise celular, com solução Promega, digestão de proteínas por proteinase K, precipitação com proteínas com solução Promega e precipitação do DNA com ETOH 70% gelado e ressuspendido com solução Promega. Este protocolo resulta em um DNA viável para uso na reação em cadeia da polimerase (PCR).
Item Description:1678-4774